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透析袋說明介紹

更新時(shí)間:2015-05-15      瀏覽次數(shù):1845

透析袋說明|介紹
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,就叫做透析袋。
   自Thomas Graham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室zui簡(jiǎn)便zui常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。
  透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液",袋(膜)外的溶液稱為“滲出液"或“透析液"。
  透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
   透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜,目前常用的是美國Union Carbide(聯(lián)合碳化物公司)生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量,縮寫為MwCO)通常為1萬左右。
   商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為10 mm~77mm不等。為防干裂,出廠時(shí)都用10%的甘油處理過,并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去。可先用50%乙醇煮沸1小時(shí),再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/LEDTA溶液洗滌,zui后用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí)驗(yàn)證明,50%乙醇處理對(duì)除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,若長(zhǎng)時(shí)間不用,可加少量NaN2,以防長(zhǎng)菌。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口,用時(shí)必須仔細(xì)檢查,不漏時(shí)方可重復(fù)使用。
  新透析袋如不作如上的特殊處理,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。使用時(shí),一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時(shí),袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析隔夜時(shí),體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
   檢查透析效果的方法是:用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3檢查NaCl、KCl等。
  為了提高透析效率,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡(jiǎn)易的透析裝置。  
 根據(jù)個(gè)人使用經(jīng)驗(yàn),建議使用透析袋效果比較好,還有具體需要什么規(guī)格的要看你的目的蛋白量有多大,才能決定使用多大的截留分子量的透析袋,一般截留量越大價(jià)格也就會(huì)越高,還有就是透析袋寬度的選擇,要看你的實(shí)驗(yàn)一次需要透析多少量來決定。

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