污污网站观看-污污网站大全-污污视频在线免费看-污污视频在线观看黄-91精品日韩-91精品人成在线观看

技術文章/ ARTICLE

我的位置:首頁  >  技術文章  >  淋巴細胞分離液

淋巴細胞分離液

更新時間:2010-12-16      瀏覽次數:809

用途:


--------------------------------------------------------------------------------

用于體外分離外周淋巴血細胞,也是和從其他來源中分離單核細胞,包括臍帶血細胞和骨髓細胞。

 

方法概述:


--------------------------------------------------------------------------------

 

       細胞分離液白細胞早期的方法,總是伴隨紅細胞聚集,只輕微影響白細胞。通過離心,紅細胞密度增加聚集,同時可以從離心管上部收集白細胞。

       Böyum提出了一種更方便,通過使用Ficoll® 甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll?甲泛影鈉溶液中分層,低速短時離心。紅細胞和沉降到管底的粒細胞,和單個核細胞(淋巴細胞)和血小板可以從兩個分層之間收集。

許多研究者不斷努力,修訂了Böyum方法,MP生物醫學公司生產的LSM,方法的*之處是運用,泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。

程序原理:


--------------------------------------------------------------------------------

除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30分鐘。通過離心,遷移能力不同zui終形成不同的細胞層。

大部分的紅細胞和粒細胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同,淋巴細胞和其他單個核細胞(單核細胞和血小板)分布在在血漿和LSM兩層中間。淋巴細胞可以通過回抽分層回收,在進一步去除血小板,LSM和血漿。

試劑:


--------------------------------------------------------------------------------

LSM® is a sterile filtered solution which contains 6.2g Ficoll and 9.4 g sodium diatrizoate per 100 ml. The density is 1.0770-1.0800 g/ml at 200C.

LSM® 是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。

使用說明:


--------------------------------------------------------------------------------

以下的操作步驟是zui初由Böyum.設計的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血劑處理人體血液;這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合

2. 無菌轉移3 mlLSM到15 ml離心管中。

3. 混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2 ml 生理鹽水

4. 仔細的將稀釋血液加入3 mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。

5. 室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細胞和多核白細胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細胞,如上圖所示。

6. 吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿。

7. 吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM和轉移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。

8. 用平衡鹽緩沖液清洗細胞,用適當的培養基重懸細胞。

 

透析袋細胞分離液抗體細胞因子fermentaswako
主站蜘蛛池模板: 国产国语毛片 | 亚洲综合色播 | 高清影院在线欧美人色 | 天天白天天谢天天啦 | 美国一级欧美三级 | 国产日韩欧美亚洲综合首页 | 日韩欧美三级 | 国产三级在线看 | 亚洲视频在线免费播放 | 国产欧美日本在线 | 91麻豆天美 | 日本www色视频 | 天堂成人一区二区三区 | 国产vs久久 | 国产精品成人一区二区三区 | 四虎网站网址 | 久久国产自偷自偷免 | 亚洲久优优色优在线播放 | 久久99九九99九九99精品 | 免费中文字幕不卡视频 | 制服丝袜国产精品 | 7色影院| 欧美成年人视频 | 国产成人亚洲精品影院 | 欧美性色xo影院在线观看 | 久久福利网 | 天天躁日日躁狠狠躁中文字幕老牛 | 性开放网站 | 欧美婷婷综合 | 欧美1区2区3区 | 九九九九在线精品免费视频 | 在线观看国产91 | 九色九色九色在线综合888 | 亚洲视频福利 | 欧美在线视频你懂的 | 鸡毛片| 国产成人精品区在线观看 | 91精品国产高清久久久久 | 日韩欧美亚洲综合 | 黄色一级毛片免费 | 午夜视频18 |